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載體構(gòu)建實驗常見問題及解決辦法
2026-01-19

1.PCR載體構(gòu)建大部分時候都要通過PCR的方法獲取目的片段,擴(kuò)增PCR的時候大家盡量選用高保真的PCR酶來進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增之前我們首先要了解目的基因序列信息。其次高質(zhì)量的模板對PCR成功與否也很重要,以質(zhì)粒作為模板的PCR相對來說先擴(kuò)增,基...

  • 2025-12-22

    養(yǎng)細(xì)胞的小伙伴們都知道,細(xì)胞一定要傳代,因為細(xì)胞在培養(yǎng)過程中不斷的繁殖,數(shù)量也隨之增加,然而培養(yǎng)皿/培養(yǎng)瓶的空間有限,增殖受到抑制,所以必須將一部分細(xì)胞移至別的培養(yǎng)皿/培養(yǎng)瓶,讓細(xì)胞有足夠生長空間。細(xì)胞傳代也不僅僅是為細(xì)胞安一個更大的“家”...

  • 2025-12-19

    一、原代人腦膠質(zhì)瘤成纖維細(xì)胞培養(yǎng)條件培養(yǎng)條件空氣,95%;CO2,5%;37℃生長特性上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。凍存條件無血清凍存液細(xì)胞背景膠質(zhì)瘤,其中以星形細(xì)胞瘤和極性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤較為多見,其次是少枝膠質(zhì)細(xì)胞瘤、室管膜膠質(zhì)瘤、髓母細(xì)胞...

  • 2025-12-19

    原代細(xì)胞的培養(yǎng)原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)。因此,較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì),如果是正常細(xì)胞,仍然保留二倍體數(shù)。但實際上,通常把di一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為...

  • 2025-12-17

    一、質(zhì)粒保存的重要性質(zhì)粒是染色體外能自主復(fù)制的遺傳因子,對宿主生存來說并非wang全必需,但攜帶著重要的基因信息,對細(xì)胞的遺傳強度和多樣性起著至關(guān)重要的作用。在生物科學(xué)研究中,質(zhì)粒被廣泛應(yīng)用于基因工程、遺傳學(xué)研究等領(lǐng)域。因此,確保質(zhì)粒的穩(wěn)定...

  • 2025-12-15

    離子交換層析的核心原理是利用待分離物質(zhì)(如抗體、雜蛋白)與離子交換樹脂之間的靜電相互作用差異,通過調(diào)節(jié)緩沖液的pH或離子強度,實現(xiàn)不同物質(zhì)的可逆結(jié)合與洗脫分離。1.離子交換樹脂的結(jié)構(gòu)與類型離子交換樹脂是層析的固定相,由惰性載體(如纖維素、瓊...

  • 2025-12-12

    多克隆抗體的純化方法主要依據(jù)抗體的理化性質(zhì)(電荷、分子量、特異性結(jié)合能力)設(shè)計,常用的有粗純化方法(鹽析法)和精細(xì)純化方法(親和層析、離子交換層析等),具體如下:1.鹽析法(硫酸銨沉淀法)——粗純化原理:中性鹽(常用硫酸銨)會破壞蛋白質(zhì)的水...

  • 2025-12-10

    大腸桿菌的繁殖方式主要是通過二分裂進(jìn)行無性繁殖,這是一種高效且快速的繁殖方式,使其能夠在適宜的環(huán)境下迅速增加數(shù)量。下面詳細(xì)介紹大腸桿菌的繁殖過程及其相關(guān)特性。繁殖過程大腸桿菌的繁殖過程主要包括以下幾個步驟:1.DNA復(fù)制:在繁殖開始前,大腸...

  • 2025-12-8

    什么是ATCC細(xì)胞株?ATCC,即美國典型培養(yǎng)物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection),成立于1925年。它致力于收集、鑒定、保存和分發(fā)各類生物材料,包括細(xì)菌、病毒、真菌、植物和動物細(xì)胞等。其中,ATCC細(xì)胞...

  • 2025-12-5

    細(xì)胞用FITC-AnnexinV/PI熒光雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒檢測效果圖。Jurkat細(xì)胞用1μM喜樹堿(Camptothecin)(左)或未加藥(右)處理4h,F(xiàn)ITC-AnnexinV/PI熒光雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒染色后,流式細(xì)胞儀...

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