ThermoStable FEN1試劑試劑熱穩(wěn)定Flap核酸內(nèi)切酶1催化切除分叉雙鏈DNA底物中的5'Flap結(jié)構(gòu)，產(chǎn)生5'磷酸末端。FEN1消化產(chǎn)物可以經(jīng)DNA連接酶而形成雙鏈DNA。在體內(nèi)，F(xiàn)EN1是岡崎片段加工成熟的基本元件，并參與調(diào)控堿基切除修復(fù)過程。

單位定義

1單位指在20ul反應(yīng)體系中，65℃的條件下，10分鐘切1pmol含5'flap結(jié)構(gòu)的寡核苷酸底物所需要的酶量。

熱失活

否

儲存

置于-20°C可保存2年，避免反復(fù)凍融。

ThermoStable FEN1試劑試劑恒溫擴(kuò)增使用策略及實例展示

應(yīng)用實例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果，可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺期)。

應(yīng)用實例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。

應(yīng)用實例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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