葉綠體是光合作用的細(xì)胞器，在光合作用研究中，常需要用提取的葉綠體展開(kāi)下游研究工作，葉綠體中所含的色素主要有兩大類(lèi)

，葉綠素(包括葉綠素a和葉綠素b)和類(lèi)胡蘿卜素(包括胡蘿卜素和葉黃素)，它們與類(lèi)囊體膜上的蛋白質(zhì)結(jié)合，成為色素蛋白復(fù)合

體，其中葉綠素又稱葉綠體色素(Chlorophyll)；類(lèi)胡蘿卜素是一種脂溶性且具有營(yíng)養(yǎng)特性的化合物，給植物和動(dòng)物提供天然色素

，是重要的抗氧化劑，并有能力轉(zhuǎn)換為必需維生素，類(lèi)胡蘿卜素可預(yù)防細(xì)胞，組織和基因損毀，增強(qiáng)身體免疫系統(tǒng)，抵御感染，

減少癌癥風(fēng)險(xiǎn)，保護(hù)心臟。

植物總酚(TP)檢測(cè)試劑盒(微板法)檢測(cè)原理是類(lèi)胡蘿卜素不溶解于水，而溶于有機(jī)溶劑，以有機(jī)溶劑粗提類(lèi)

胡蘿卜素，根據(jù)朗伯-比爾定律，某有色溶液的吸光度(A)與其中溶質(zhì)濃度(C)和液層厚度(L)成正比，即A=αCL，其中α為比例常

數(shù)，當(dāng)溶液濃度以百分比濃度為單位，層液厚度為1cm時(shí)，α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。在本試劑盒情況下葉綠素a、葉綠素b、

類(lèi)胡蘿卜素分別在665nm、649nm、470nm處有最大吸收波，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)公式可計(jì)算出葉綠素a、葉綠素b、總?cè)~綠素、類(lèi)胡蘿卜

素含量，主要用于植物組織中葉綠素、類(lèi)胡蘿卜素的提取以及以酶標(biāo)儀定量檢測(cè)葉綠素a、葉綠素b、總?cè)~綠素、類(lèi)胡蘿卜素含量

。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考)：

自備材料：

1、蒸餾水

2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管

3、低溫離心機(jī)、恒溫箱或水浴鍋、酶標(biāo)儀、酶標(biāo)板

操作步驟(僅供參考)：

1、準(zhǔn)備樣品∶

①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉，加入2.5ml PAL Lysis Buffer，冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿，4℃ 10000r/min

離心15~20min，留取上清液，-20℃凍存，用于苯丙氨解氨酶的檢測(cè)。

②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測(cè)定，-20℃凍存，用于苯丙解氨的檢測(cè)。

③細(xì)胞或組織樣品∶取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液，如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿，4℃ 10000r/min離心15~20min，取上清液，

-20℃凍存，用于苯丙酸解氨酶的檢測(cè)。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶，可以使用蒸餾水或PAL

Lysis Buffer稀釋進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>

2、PAL加樣∶

取96孔板，按照下表設(shè)置對(duì)照孔、測(cè)定孔，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并

注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的PAL活性過(guò)高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置2平行孔，

求平均值。

加入物（μl）對(duì)照孔測(cè)定孔

蒸餾水150100

待測(cè)樣本5050

PAL Assay Buffer-50

3、PAL檢測(cè)︰

以對(duì)照孔為對(duì)照(調(diào)零)，酶標(biāo)儀立即測(cè)定290nm處測(cè)定孔的吸光度(記為   A測(cè)定0);40℃準(zhǔn)確孵育1h，立即加入10μl PAL終止

液終止反應(yīng)(備選方案)，以對(duì)照孔為對(duì)照調(diào)零，酶標(biāo)儀立即測(cè)定290nm處測(cè)定孔的吸光度(記為A測(cè)定1)。

注意︰加入PAL終止液終止反應(yīng)為非必須步驟，可37℃準(zhǔn)確孵育1h后直接以對(duì)照孔為對(duì)照調(diào)零，酶標(biāo)儀立即測(cè)定290nm處測(cè)定

孔的吸光度。

注意事項(xiàng)∶

1、待測(cè)樣品中不能含有酶抑制劑，同時(shí)需避免反復(fù)凍融。

2、獲得上清液為PAL酶液，應(yīng)盡快檢測(cè)，亦可-20°℃保存。

3、如果沒(méi)有可測(cè)定紫外區(qū)的酶標(biāo)儀和酶標(biāo)板，也可以使用紫外分光光度計(jì)和石英比色皿，但應(yīng)注意比色杯的最小檢測(cè)體積。

4、每次檢測(cè)指標(biāo)不宜過(guò)多，否則操作時(shí)間不一，有可能導(dǎo)致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

植物總酚(TP)檢測(cè)試劑盒(微板法)更多產(chǎn)品咨詢：

pLV3-CMV-DUOXA1(human)-3×FLAG-CopGFP-Puro

pLV3-CMV-FOS(human)-3×Myc-Neo

pCMV-ASAP3(human)-3×FLAG-Neo

PiggyBac-EF1a-SLC5A2(human)-Puro

pLV2-CMV-3×FLAG-MCS-IRES-Puro

pLV-U6-MCS-sgRNA-Blast-EGFP

pCMV-SERPINE1(human)-Neo

pLV2-CMV-LEO1(human)-EGFP-Puro

pLV3-CMV-COPZ1(human)-3×FLAG-CopGFP-Puro

pCMV-HAVCR1(human)-EGFP-Neo

pCMV-Mgst1(mouse)-5×FLAG-Neo

pLV3-CMV-BUD23(human)-3×FLAG-CopGFP-Puro

pLV3-CMV-BUD23(human)-3×FLAG-CopGFP-Puro

pCMV-HA-YWHAG(human)-Neo

pCMV-SERPINE1(human)-mut-Neo

pLV3-U6-COL8A1(human)-shRNA1-CopGFP-Puro

pLV3-U6-NR2F1(human)-shRNA3-EGFP-Puro

pLV3-U6-RAD51(human)-shRNA3-Puro

pAAV-U6-Pparg(mouse)-shRNA3-ZsGreen1

pAAV-U6-Pparg(mouse)-shRNA2-ZsGreen1

pLV3-U6-SQSTM1(human)-shRNA1-Puro

pLV3-U6-ZWINT(human)-shRNA1-CopGFP-Puro

pLV3-U6-RAD51(human)-shRNA1-Puro

pLV3-U6-ccdb-sgRNA-Cas9-EGFP-Puro

pLV3-U6-ccdb-shRNA-EF1a-CopGFP-Puro

pCMV-C130071C03Rik(mouse)-lncRNA-Neo

pCMV-PTPRM(human)-3×FLAG-Neo

pLV2-CMV-TAF4B(human)-EGFP-Puro

pCMV-APOBEC3B(human-Toxic-opt)-3×FLAG-Neo

pCMV-AR(human)-3×FLAG-Neo

pCMV-CARD9(human)-3×HA-Neo

pCMV-Prkcz(mouse)-HA-Neo

pCMV-Trim21(mouse)-3×HA-Neo

pLV2-CMV-3×Myc-LDHA(human)-Puro

pLV2-CMV-3×Myc-USP10(human)-Puro

pCMV-Runx2(mouse)-3×HA-Neo

pAAV-CMV-Aldh2(mouse)-ZsGreen1

pCMV-SENP2(human)-3×FLAG-Neo

pTac-GST-CTNNB1(human)

pCMV-MCM7(human)-3×HA-Neo

pX459 V2.0-Blast

pCMV-VPS11(human)-3×Myc-Neo

pCMV-LIG1(human)-3×HA-Neo

pCMV-DCN(human)-3×FLAG-WPRE-Neo

pCMV-CCN4(human)-3×FLAG-WPRE-Neo

pLV2-CMV-DCP1A(human)-EGFP-Puro

pLV3-CMV-BLM(human)-3×FLAG-CopGFP-Puro

pCMV-ALKBH3(human)-3×FLAG-Neo

pLV3-CMV-BCL6(human)-3×FLAG-CopGFP-Puro

pLV2-CMV-3×Myc-TRIM21(human)-Puro

pLV2-CMV-3×Myc-TRIM25(human)-Puro

pCMV-CDK11B(human-Toxic-opt)-3×FLAG-Neo

pCMV-EGFP-HNRNPA2B1(human-Toxic-opt)-Neo

pLV3-CMV-Slc4a10(mouse)-3×FLAG-CopGFP-Puro

pCMV-WNT5A(human)-EGFP-6×His-Neo

pLV3-CMV-RASSF8(human)-Fluc-Puro

pCMV-EGFP-RAB34(human)-Neo

pLV3-CMV-TXNRD1(human)-3×HA-CopGFP-Puro

pCMV-ZNRF1(human)-HA-Neo

pAAV-CMV-Acss3(mouse)-ZsGreen1

pLV3-CMV-RCOR2(human)-3×HA-Neo

pCMV-PDIA5(human)-3×HA-Neo

pCMV-Fam50a(mouse-Toxic-opt)-3×FLAG-Neo

pCMV-Wnt4(rat)-EGFP-Neo

pCMV-EGFP-Wnt4(rat)-Neo