慢病毒載體應用

1 體外感染細胞

慢病毒載體能夠有效地感染培養(yǎng)的腫瘤細胞、肝細胞、心肌細胞、神經(jīng)元、內(nèi)皮細胞、干細胞等多種類型原代細胞和大部分細胞系。慢病毒的感染具有整合特性，能夠?qū)⑼庠椿蛴行У卣系剿拗魅旧w上，因而可以達到持久性表達，從而構(gòu)建穩(wěn)定細胞株，用于基因的細胞功能研究。

體外使用慢病毒感染細胞需要注意，由于每種細胞對慢病毒的敏感性不同，有的容易感染，有的比較難，同時每種慢病毒載體熒光強度也有差異，所以正式實驗前需要做病毒感染預實驗來確認MOI值以達到理想的實驗效果。

MOI值是multiplicity of infection 的縮寫，即感染復數(shù)，其含義是感染時病毒與細胞的數(shù)量比值，一般以實驗中某個細胞，感染達到80%，定義為這個細胞的MOI值，即病毒量與細胞數(shù)的比值；加的病毒量(μl)=細胞數(shù)×MOI/滴度(…/ml) ×1000

注意：理論上MOI值越高，慢病毒感染上的可能性越大，感染效率越高，但是這樣對細胞的毒性也越大，因此，預實驗確認MOI值要在細胞成活率和感染效率中找到一個平衡點。一般如果MOI超過100，甚至200還感染不是，說明慢病毒非常難感染這株細胞，甚至感染不上，考慮換一種方式，如腺病毒或電轉(zhuǎn)。

2 體內(nèi)構(gòu)建成瘤模型

體內(nèi)應用時，慢病毒可以攜帶目的基因或螢光素酶基因，篩選穩(wěn)定表達的腫瘤細胞株，直接接種構(gòu)建皮下成瘤模型，或通過原位或靜脈注射等方式構(gòu)建轉(zhuǎn)移模型，活體成像檢測用于研究體內(nèi)腫瘤的發(fā)生發(fā)展或轉(zhuǎn)移等。

慢病毒載體基礎(chǔ)知識及應用

此外，也可以體內(nèi)定位注射慢病毒，或瘤內(nèi)注射慢病毒等。